樣品RNA的抽提：
①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
1）紫外吸收法測(cè)定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測(cè)定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
OXOID胰蛋白胨TWEAK Receptor/Fn14 AntibodyR-1-BOC-2-氨甲基哌啶

β-萘黃酮Phospho-EGF Receptor (Tyr1148) Antibody氯-基吡啶

氯舒隆LCN2 (D4M8L) Rabbit mAb反式-(-)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽

氯舒隆(標(biāo)準(zhǔn)品)TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb2-溴乙酰

L-抗壞血酸-2-酸三鈉鹽；Vc酸酯鈉TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb二基二甲氧基硅烷

IBMX, 異丁基-1-甲基EGF Receptor (15F8) Rabbit mAb鉑(0)-1,二乙-1,1,3,四甲基二硅氧烷

鹽酸普魯卡因BNIP3 (D7U1T) Rabbit mAb1-甲基-1-亞

鹽酸普魯卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb2-溴-2'-乙酮

伏立諾他雜質(zhì)Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb9-菲酸

當(dāng)藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) (53A5) Rabbit mAb溴代二酸二乙酯

皂素(進(jìn)分)Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) (53A5) Rabbit mAb2-氯-氨基吡

苦豆Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjuga) 6-基-2-氯吡

松柏Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 555 Conjuga) 乙炔鋰乙二絡(luò)合物

乙酰輔酶A鈉鹽Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjuga) 2,二氯酸

甘氨膽酸Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjuga) 甲氧基-甲酸

甘氨膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 555 Conjuga)酸三丁酯

肌苷酸二鈉DNMT3B (E9X7R) Rabbit mAb (Mouse Specific)6-羥基嘌呤

環(huán)索奈德Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjuga) 1-溴-2-氟-三氟甲氧基
貓附紅細(xì)胞體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒倉(cāng)鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化14-3-3 ζ抗體IgG20 ul

駱駝ELISA試劑盒2,4-D/FITC  熒光素標(biāo)記2，4-二氯氧乙酸抗體IgG100 ul

駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒4E-BP1/EIF4EBP1/FITC  熒光素標(biāo)記4E結(jié)合蛋白1抗體IgG20 ul

駱駝脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒4EBP1(phospho Ser64) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG100 ul

駱駝天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG300 ul

駱駝過氧化氫酶ELISA試劑盒phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體IgG100 ul

駱駝谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)ELISA試劑盒14-3-3/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記14-3-3抗體IgG100 ul

駱駝氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒5-HT/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色抗體IgG300 ul

駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒5-HT/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記5-羥色抗體IgG100 ul