特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！ 產(chǎn)品名稱 | 厭氧消化鏈球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Peptostreptococcus anaerobius | 貨號 | YSP97066 |
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
氫/鉀離子交換ATP酶α肽(ATP4α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 釀酒酵母 1g 衰老關鍵蛋白3(FBLN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 根瘤菌 5g 胰脂肪酶(PL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥99% 草地阿格雷氏菌 25MG 核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 孢淡灰鏈霉菌 25g 髓分化因子88(MyD88)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 尖孢鐮刀菌 5g 法尼酯X受體(FXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 平田頭菇7-2 1g 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 肉葡萄球菌（可訂） 5g 趨化因子C-X-C-基元受體7(CXCR7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 總狀毛霉 1g 脂酶A2受體1(PLA2R1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 青色糖單孢菌 25g 封閉蛋白11(CLDN11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 暗色節(jié)菱孢* 5g 前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 豇豆慢生根瘤菌 10MG DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 橙色桿狀菌 1g DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 印度毛殼 5g 死亡關聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 草木樨中華根瘤菌 1g 原鈣黏素β16(PCDHβ16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 牧草紅酵母 5g 多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 枯草芽孢桿菌 250mg 鈣離子轉(zhuǎn)運ATP酶A2(ATP2A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 0.5M四溶液 光滑青霉 100ml 中間α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 試劑級 土曲霉原變種 100g
厭氧消化鏈球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒耳聾-甲狀腺腫綜合征相關COBL蛋白抗體Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原300 ul 20號染色體開放閱讀框195抗體Gastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素（多肽源）1 Kit 7號染色體開放閱讀框62抗體myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原100 ul 9號染色體開放閱讀框174抗體Insulin proin (from porcine pancreas) 豬胰島素蛋白300 ul 6號染色體開放閱讀框64抗體bovine Insulin proin 牛胰島素蛋白100 ul 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽100 ul 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體TRH (Thyrotropin releasing hormone ) 促甲狀腺素釋放激素300 ul 周期素樣Y1抗體PAR-2 AP (Proase-activad receptors-2 Activating polypeptide) 蛋白酶激活受體-2激活肽100 ul 周期素J抗體Cygb (cytoglobin) 細胞球蛋白抗原20 ul |
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