樣品RNA的抽提：
①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
6-芐氨基嘌呤SignalSilence® UCHL1 siRNA I甲氧基-5-三氟

純水(HPLC grade)ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb2-氟酸乙酯

馬來酸,順二酸β-Amyloid (1-37 Specific) (D2A6H) Rabbit mAb (Biotinylad)2-氯-氟吡啶

硫酸銨Syk (D1I5Q) Rabbit mAb溴-硝基三氟甲

氯化銫Src Blocking Peptide溴基砜

酸氫二鈉七水SAMHD1 Antibody2-氯氟

dATP溶液(100 mM)DLAT (4AB6-C10) Mouse mAb3'-氯酮

癸酸鈉Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb4'-氟-2-基乙酮

交聯(lián)聚乙基吡咯烷酮(PVPP)ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb (Biotinylad)6-溴異喹啉

瓊脂糖(美侖電泳級)Nitrocellulose Sandwiches甲基炔基

Bis-Tris；雙(2-羥乙基)氨基(三羥甲基)Thyroid Transcription Factor 1 (TTF-1) (D2E8) Rabbit mAb2-甲氧基噻唑

瓊脂糖(Sigma)SimpleChIP® Human RUNX2 Promor Primers6-溴-羥基喹啉

植物血凝素SimpleChIP® Human MITF Promor Primers甲基吡唑

50% 戊二溶液Immunofluorescence Antibody Dilution Buffer2-氯-酸

6-糠基氨基嘌呤,激動素AUF1/hnRNP D (D6O4F) Rabbit mAb3,5-二甲基-硝基吡唑

乙二雙(2-氨基乙基)四乙酸PathScan® Total Caveolin-1 Sandwich ELISA Kit2-乙氧基吡啶

無水酸二氫鈉(分子生物學(xué)級)UHRF1 (D6G8E) Rabbit mAb2-氯煙酸乙酯

月桂?；“彼徕c(分子生物學(xué)級)BackDrop® Green Background Suppressor噻唑-5-甲酸
五日熱巴爾通體探針法熒光PCR檢測試劑盒豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒Dynamin 2  酶動力蛋白2抗體300 ul

豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒Nadrin  Dysbindin抗體100 ul

豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒Dysferlin  Dysferlin蛋白抗體300 ul

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒E2F1  轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體100 ul

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒E2F2  轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體100 ul

豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒E2F3  轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體100 ul

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒E2F4  轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體100 ul

豚鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒E2F5  轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體300 ul

豚鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒E2F6  轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體100 ul