PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的，隨著反應循環(huán)數的增加，終PCR反應不再以指數形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數與PCR產物的數量成正比，因此，根據PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段， PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
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冠蛋白1A(CORO1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　魯氏不動桿菌　5g

維生素D(VD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　賴氨酸芽胞桿菌屬　1g

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肽酰甘氨酸α酰胺化單氧酶(PAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　大腸埃希菌　1g

海藻糖酶(TREH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　pHY300PLK　250mg

丙酮酸羧化酶(PC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　Enterobacter cowanii　5g

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Bcl2拮抗/殺傷因子1(BAK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　白蘑　5g

肝臟酸果糖激酶(PFKL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　大腸埃希菌　25g

上皮基質相互作用蛋白1(EPSTI1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　缺陷短波單胞菌　5g

葡萄糖-6-酸酶催化亞基(G6PC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　沙雷氏菌　100g

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阿米洛利敏感鈉離子通道蛋白1α(SCNN1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　產氣腸桿菌　500g

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絲氨酸蛋白酶33(PRSS33)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　破傷風試驗毒素　25g

腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　釀酒酵母　5g
無綠藻通用探針法熒光PCR檢測試劑盒畸形表皮自調節(jié)因子1抗體ABCD-1/CCL22  嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗原100 ul

腦發(fā)育同源蛋白2抗體MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Proin 3 Beta)  巨噬細胞炎性蛋白19抗原1 Kit

周期素D相互作用蛋白1抗體CCL26(Eotaxin 3)  嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗原100 ul

發(fā)育相關蛋白DDX3Y抗體CCR-1(CC chemokine receptor 1)  細胞表面趨化因子受體1抗原1 Kit

核仁蛋白NAP57抗體CCR-3(CC chemokine receptor 3)  CC趨化因子受體3抗原1 Kit

DLST蛋白抗體CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A)  細胞表面趨化因子受體2A抗原1 Kit

橋粒斑蛋白1+2抗體CCR-4(C-C chemokine receptor 4)  細胞表面趨化因子受體4抗原100 ul

橋粒芯糖蛋白2抗體CCR-6/CD196 peptide  細胞表面趨化因子受體6抗原1 Kit

細胞發(fā)育相關蛋白DAZL抗體CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide  細胞表面趨化因子受體6抗原1 Kit