產(chǎn)品名稱：食品中亞硝酸鹽含量試劑盒品牌

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016464

檢測(cè)方法：可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：氮代謝系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

枯草芽孢桿菌組織DYRK1A激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠褪黑(MT)試劑盒

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌細(xì)胞ERK1激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠載脂H(Apo-H)試劑盒

紅菇屬組織ERK1激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒

亮葉耳環(huán)根瘤菌細(xì)胞ERK2激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒

球孢白僵菌組織ERK2激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠白介2受體(IL-2R)試劑盒

長枝木霉細(xì)胞GSK3α激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)試劑盒

豌豆根瘤菌組織GSK3α激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠可溶性瘦受體(sLR)試劑盒

毛栓孔菌細(xì)胞GSK3β激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒

根霉屬的菌組織GSK3β激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠肝脂(HL)試劑盒

地衣芽胞桿菌細(xì)胞GSK3激總活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)試劑盒

旋柄腐霉組織GSK3激總活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)試劑盒

米曲霉細(xì)胞IKKα激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)試劑盒

鏈格孢組織IKKα激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)試劑盒

近平滑假絲酵母細(xì)胞IKKβ激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠二氧化(DAO)試劑盒

釀酒酵母組織IKKβ激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒

生孢梭菌細(xì)胞IRAK1激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒

疣孢青霉組織IRAK1激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠活化C(APC)試劑盒

泛枝芽孢桿菌細(xì)胞IRAK4激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠α葡萄糖苷(a-Glu)試劑盒

廈門脫硫桿狀菌組織IRAK4激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠胰(trypsin)試劑盒

水生拉恩氏菌細(xì)胞JNK1激活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）小鼠破骨分化因子(ODF)試劑盒
食品中亞硝酸鹽含量試劑盒品牌賴氨氧化2檢測(cè)試劑盒活化激D抗體

賴氨氧化3檢測(cè)試劑盒Jun激活區(qū)域-連接1抗體

脫鎂葉綠檢測(cè)試劑盒化酪氨激JAK-2抗體

甘油激檢測(cè)試劑盒酪氨激JAK-3抗體

BCA檢測(cè)試劑盒化酪氨激JAK-3抗體

壁性轉(zhuǎn)化檢測(cè)試劑盒化酪氨激JAK-3抗體

色P450羥化檢測(cè)試劑盒化原癌基因c-Jun抗體

木質(zhì)過氧化檢測(cè)試劑盒質(zhì)酪氨激JAK2抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。