熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為T(mén)aqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
硝烷(光譜級(jí),≥99%)p190-B RhoGAP Antibody吲哚-6-羧酸

新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物(99%)RhoGDI Antibody吲哚-5-羧酸

石油(光譜純,bp 60-90 °C)Stat5 (D3N2B) Rabbit mAb溴-2-噻吩羧酸

石油(光譜純,bp 30-60 °C)Stat5 (D3N2B) Rabbit mAb辛可尼丁

溴化(光譜純SP)TCF4/TCF7L2 (C9B9) Rabbit mAb1,8-雙二甲氨基萘

偶氮胂Ⅰ水合物(90%)SimpleChIP® Human c-Fos Upstream Primers2-氟-5-硝基三氟甲

硝酸(≥65%(T),Hg ≤0.0000005%)Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)羥基乙

吡啶(光譜級(jí),≥99.5%(GC))Phospho-LRP6 (Ser1490) Antibody(S)-(-)-1-(1-萘基)乙

鄰二甲酸氫(SP)Phospho-LRP6 (Ser1490) Antibody聯(lián)二氯芐

亞硝酸鈉(SP)Phospho-LRP6 (Ser1490) Antibody溴-1-萘甲酸

無(wú)水硫酸鈉(SP)Human Insulin-like Growth Factor II (hIGF-II)()酸

三氯乙(光譜純, ≥99.5% (GC),含40ppm二異 穩(wěn)定劑)TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb對(duì)酸

四(光譜級(jí),≥99.5%)TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb5-硝基-6-甲基脲嘧啶

三（TFA）(光譜級(jí))Acetyl-p53 (Lys379) Antibody氟-三氟甲酸

1,2,三氯(光譜純)Acetyl-Histone H2B (Lys20) Antibody(乙基哌-1-基)

四氯乙(光譜純,≥99%)Heregulin Antibody異基-5-氨基異噁唑

二甲基砜(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品)Acetyl-Histone H2B (Lys5) AntibodyN-基咔唑

鄰二甲酸氫(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn),99.998%)Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody溴-2-氟
倍贊氏金蠅探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒mTOR  雷帕霉素靶蛋白抗體100 ul

C1q/TNF相關(guān)蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)ELISA試劑盒Phospho-mTOR (Ser2448)  酸化雷帕霉素靶蛋白抗體100 ul

B因子(BF)ELISA試劑盒Phospho-mTOR (Ser2481)  酸化雷帕霉素靶蛋白抗體100 ul

B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)ELISA試劑盒MTLR  胃動(dòng)素受體抗體100 ul

B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒CA15-3/Muc1/CD227  粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體100 ul

B細(xì)胞淋巴瘤因子6(Bcl6)ELISA試劑盒Muc2  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體20 ul

B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒mucin3/Muc3  粘蛋白-3抗體100 ul

B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒mucin 5B/Muc5B  粘蛋白-5B抗體100 ul

B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒mucin4/Muc4(human)  粘蛋白-4抗體300 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。