產(chǎn)品名稱：箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Batrachochytrium dendrobatidisPCR
編號：HE30689-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
28S抗核糖體抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP 包裝;25g

26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

25羥基維生素D3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>95%，BR 包裝;1g

25羥基維生素D2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>50%,BS 包裝;5g

20S蛋白酶體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;100g

2,3-二磷酸甘油酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;25g

2,3Dinor血栓烷B2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

2 型次核苷酸脫氫酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;1g

Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

Ⅰ型前膠原N端前肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：BR 包裝;5g

Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：BR 包裝;5g

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;1g

Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：BR 包裝;5g

Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：鉍含量：>56%,BR 包裝;10ml

Ⅰ型膠原試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;1g

1型1-磷酸鞘氨醇受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%，植物激素級 包裝;250mg

17-酮類固醇試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：BR 包裝;25g
箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒說明書Sporolactobacillus inulinus 中文名稱：菊糖芽孢乳桿菌種屬:Sporolactobacillus inulinus分離基物:雞飼料提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:、D-乳酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，厭氧 純度：98%

Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis 中文名稱：類紅紅細(xì)菌種屬:Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:109生長條件:30℃ 純度：98%

Porphyromonas gingivalis 中文名稱：牙齦卟啉單胞菌種屬:Porphyromonas gingivalis分離基物:人類齦溝提供形式:凍干管，斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:，質(zhì)量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:TSA+5%脫纖維羊血：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g，氯化鈉 5.0g，瓊脂 15.0g，5%脫纖維羊血，pH7.3±0.2。121℃，15min。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長條件:37℃，厭氧。存儲條件:2-8℃冷藏 純度：98%

pyxidicoccusfallax 中文名稱：匣狀粘球菌種屬:pyxidicoccusfallax安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度：98%

CystobacterSP. 中文名稱：孢囊桿菌種屬:CystobacterSP.安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度：98%

Corallococcusexiguous 中文名稱：弱小珊瑚桿菌種屬:Corallococcusexiguous安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度：98%

Myxococcusxanthus 中文名稱：黃色粘球菌種屬:Myxococcusxanthus安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度：銥含量：43%

Pseudomonasalcaligenes 中文名稱：產(chǎn)堿假單胞菌種屬:Pseudomonasalcaligenes分離基物:游泳池提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mgMnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃;好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：銥含量：43%