PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
丁香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)PathScan® Phospho-Tyro3 (panTyr) Sandwich ELISA Kit乙基三基溴化膦

東莨菪苷（標(biāo)準(zhǔn)品）LysRS Antibody乙氧甲?；寤?/span>

東莨菪內(nèi)酯CLIC1 (D7D6H) Rabbit mAb吡唑羧酸甲酯

冬凌草甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)ENPP1 (D37B7) Rabbit mAb*基乙酸酐

豆腐果苷（標(biāo)準(zhǔn)品）NEDD4 (D82F4) Rabbit mAbD-2-脫氧葡萄糖

豆甾（標(biāo)準(zhǔn)品）ASCT2 (V501) Antibody兒茶精

豆甾CD2 (D5L3B) Rabbit mAb溴-基吡啶

豆甾β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (HRP Conjuga)環(huán)磺酰

硝呋腙鹽酸鹽LAT1 Antibody3,3'-二硫代二酸二甲酯

杜鵑素(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control氟-2-羥基吡啶

對傘花烴（對聚傘花素）Phospho-c-Fos (Ser32) (D82C12) XP® Rabbit mAb溴酰氯

對香豆酸;對羥基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-c-Fos (Ser32) (D82C12) XP® Rabbit mAb1H-吲唑-5-

對葉百部（標(biāo)準(zhǔn)品）Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (PE Conjuga)甲基磺酸鈉

莪術(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1-芐基氮雜環(huán)丁烷-酮

莪術(shù)二酮（標(biāo)準(zhǔn)品）LCP1 AntibodyBoc-1-哌乙酸

蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)hnRNP Q/R Antibody3,5-二氟酸

蒽醌FoxA1/HNF3α (E7E8W) Rabbit mAb順鉑

1,二咖啡酰奎寧酸(標(biāo)準(zhǔn)品)SimpleChIP® Human HMOX1 Promor Primers芐氧基酸
新兇手弗朗西斯菌探針法熒光PCR檢測試劑盒腺瘤樣息肉抗體CR1/CD35/FITC  熒光素標(biāo)記Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）IgG20 ul

溶血脂?；D(zhuǎn)移酶抗體CD36/FITC  熒光素標(biāo)記CD36抗體IgG100 ul

錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體CD38(human)/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD38抗體（）IgG100 ul

酸化間變型淋巴瘤激酶抗體CD38(mouse, rat)/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD38抗體（、）IgG100 ul

?；o酶A脫氫酶很長鏈抗體CD40L /FITC  熒光素標(biāo)記抗CD40L抗體IgG100 ul

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體CD34/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD34抗體IgG20 ul

錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體CD44/FITC  熒光素標(biāo)記CD44抗體IgG100 ul

有絲分裂激酶B抗體CD43/SPN/FITC  熒光素標(biāo)記CD43抗體IgG100 ul

酸化Ack1抗體CD44/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD44抗體IgG100 ul