PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員6(TRPM6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　云南球蓋菇　250mg

轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員7(TRPM7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　騷動(dòng)厄氏菌　5g

轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TRPV1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　Sphingomonas phyllosphaerae　1g

色胺酸羥化酶2(TPH2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　球孢白僵菌　250mg

RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止因子Ⅰ(TTF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　美澳型核果褐腐病菌　5g

Podocan蛋白(PODN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　麗齒菌屬　100g

生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　美澳型核果褐腐病菌　25g

胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黑曲霉　1g

黏病毒耐藥蛋白1(MX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　溶血性曼氏桿菌　5g

酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種　100g

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　釀酒酵母　25g

糖蛋白Ⅴ(GP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　波氏假阿利什菌　5g

白介素10受體α(IL10Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　果生鏈核盤菌　1g

白介素10受體β(IL10Rβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　裂褶菌　250mg

巢蛋白(NID)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥98%　香菇(L26)　25MG

靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　鏈格孢（可定）　250mg

連接橋粒斑珠蛋白(JUP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　亮白曲霉　5mg

抗增生抗體靶分子1(TAPA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　肉色迷孔菌（可訂）　10mg
鮭魚立克次氏體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗體BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)（多肽片斷抗原）1 Kit

CD86抗體ACA11 peptide  擬南芥ACA11蛋白多肽抗原100 ul

周期素依賴性激酶1抗體AHA3 peptide  植物蛋白AHA3抗原（擬南芥）20 ul

周期素依賴性激酶2抗體bFGF  性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（多肽抗原）300 ul

周期素依賴性激酶4抗體ACE2(Angionsin converting enzyme 2)  血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原100 ul

周期素依賴性激酶5抗體BNP  腦鈉素（多肽抗原）100 ul

1號(hào)染色體開放閱讀框200抗體BrdU (Bromodeoxyuridine)  溴脫氧尿苷300 ul

6號(hào)染色體開放閱讀框223抗體C5  過敏毒素C5（補(bǔ)體C5）抗原300 ul

纖維素酶抗體CA125 (Ovarian cancer gen)  卵巢癌抗原（抗原）300 ul