產(chǎn)品名稱(chēng)：蛋白含量(SP)試劑盒(雙縮脲法)說(shuō)明書(shū)

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016449

檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類(lèi)：氮代謝系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

KLH  血藍(lán)抗體核黃激(RFK)ELISA試劑盒

KLH  血藍(lán)抗體和肽(copeptin)ELISA試劑盒

KLK1  激肽釋放1抗體含免疫球樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激2(Tie-2)ELISA試劑盒

kappa Opioid receptor  kappa型阿片受體抗體含免疫球樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激1(Tie-1)ELISA試劑盒

mu Opioid receptor  µ-型阿片受體抗體含SET域4(setd4)ELISA試劑盒

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  化µ-型阿片受體抗體含patatin樣脂域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)ELISA試劑盒

Delta Opioid Receptor  D型阿片受體抗體過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物(LPO)ELISA試劑盒

Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)  化D型阿片受體抗體過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)ELISA試劑盒

KLK3  激肽釋放3/舒血管3抗體過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒

KLK4  激肽釋放4抗體過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

KLK7  激肽釋放7抗體過(guò)氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒

KLK9  激肽釋放9抗體過(guò)氧化氫(CAT)ELISA試劑盒

KLK10  激肽釋放10抗體過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒

KLK14  激肽釋放14抗體果糖二縮A(ALDOA)ELISA試劑盒

KMT6/EZH2  抑癌EZH2抗體果糖(FRA)ELISA試劑盒冰凍切片組織IGF 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人臍動(dòng)脈平滑肌微小RNAD-2-氨丁

石蠟切片組織IGF 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次晚期糖化終末產(chǎn)物(AGE)天然BOC-L-異亮氨

載玻片細(xì)胞IGF 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次白(ALB)天然BOC-D-色氨

冰凍切片組織IGF 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次腦型肌激(CKB)天然FMOC-D-色氨

石蠟切片組織IGF 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次糖化血紅A1c(HbA1c)天然 彈性（豬胰）

細(xì)胞IGF 表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次血紅(HB)天然 DEAE瓊脂糖凝膠FF

細(xì)胞IGF 表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次免疫球G1(IgG1)天然 葡聚糖T200

IGF 表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次免疫球G(IgG)天然 十七

IGF 免疫共沉淀分析試劑盒5次免疫球G1(IgG1)天然 人褪黑色（MS）ELISA試劑盒,MS ELISA

IGF 表達(dá)elisa試劑盒25次ISL LIM同源框1(ISL1)天然 人雌三（E3）ELISA試劑盒,E3 ELISA

細(xì)胞ANDROGEN RECEPTOR 表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次ISL LIM同源框1(ISL1)天然 人喋呤（MTX）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞ANDROGEN RECEPTOR 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次碳酐Ⅱ(CA2)天然 人S100（S-100）ELISA試劑盒,

冰凍切片組織ANDROGEN RECEPTOR 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次碳酐Ⅱ(CA2)天然 小鼠白介9（IL-9）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織ANDROGEN RECEPTOR 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次癌胚抗原相關(guān)粘附分子1(CEACAM1)天然 小鼠腎損傷分子1（Kim-1）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞ANDROGEN RECEPTOR 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次肌肌激(CKM)天然 小鼠色C（Cyt-C）ELISA試劑盒,
蛋白含量(SP)試劑盒(雙縮脲法)說(shuō)明書(shū)可溶性生激表達(dá)基因2檢測(cè)試劑盒alpha 1腎上腺能受體B抗體

可溶性Toll樣受體6檢測(cè)試劑盒Bcl2 alpha抗體

可溶性T免疫球粘分子3檢測(cè)試劑盒白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄5抗體

可溶性白介2受體檢測(cè)試劑盒BTB/POZ結(jié)構(gòu)域1（型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄8）抗體

可溶性白介6受體檢測(cè)試劑盒BCL7B抗體

可溶性白介7受體檢測(cè)試劑盒性核2(鋅指basonuclin2)抗體

可溶性白分化抗原14檢測(cè)試劑盒B白血病/淋巴瘤7抗體

可溶性白介6檢測(cè)試劑盒先天性脂肪代謝障礙2抗體（常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17）

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。