PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
SHC-轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　類布氏乳桿菌　25g

肌動(dòng)蛋白束蛋白2(FSCN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　礦泉水  鈣、鎂、鉀、鈉、鍶、硒、偏硅酸  　25g

羥甲基膽素合酶(HMBS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　栗疫菌　5g

腎小球蛋白(GLMN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　巴氏醋桿菌　1g

尿嘧啶核苷酸化酶2(UPP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　釀酒酵母　25g

堿性神經(jīng)酰胺酶1(ACER1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　假交替單孢菌　5g

堿性神經(jīng)酰胺酶2(ACER2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　日本慢生根瘤菌　1g

N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　EP　運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌　120mg

鞘氨醇激酶1(SPHK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>98.0%(GC)　鄉(xiāng)間布丘氏菌　1g

鞘氨醇激酶2(SPHK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　葉點(diǎn)霉屬　250mg

軸突生長(zhǎng)誘向因子G1(NtnG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　鹽古桿菌　1g

軸突生長(zhǎng)誘向因子3(Ntn3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　布魯氏菌 生物Ⅱ型　5g

軸突生長(zhǎng)誘向因子G2(NtnG2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥95.0%(異構(gòu)體混合物,HPLC)　中性彎曲嗜酸菌　1g

微管蛋白β1(TUBβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥95.0%(異構(gòu)體混合物,HPLC)　產(chǎn)朊假絲酵母　5g

微管蛋白β3(TUBβ3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黑木耳　100g

微管蛋白β6(TUBβ6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　中慢生華癸根瘤菌　25g

微管蛋白β4(TUBβ4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　殺鮭氣單胞菌　25g

微管蛋白α8(TUBα8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黃色短桿菌　5g
印度血吸蟲探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 proin)  Tsg101抗原1 Kit

發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體（致畸因子）TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)  促甲狀腺素受體抗原1 Kit

豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99抗體MAP1LC3A(microtubule-associad proin 1 light chain 3)  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原1 Kit

α內(nèi)磺肽抗體TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1)  肺癌腫瘤阻抑基因1抗原1 Kit

酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1)  甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原1 Kit

表皮生長(zhǎng)因子樣激素受體1抗體Tubulin- Gamma  微管蛋白-γ抗原1 Kit

CREB結(jié)合蛋白p300抗體TWIST proin peptide  TWIST蛋白抗原1 Kit

EB病毒LMP-2A蛋白抗體T Beta10 peptide  胸腺素β10抗原100 ul

EB病毒核抗原1抗體UCN(Urocortin)mouse ret  新型血管活性因子UCN抗原(、)1 Kit