熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
綠草定(標準品)Phospho-c-Abl (Tyr245) (73E5) Rabbit mAb2-[[(2'-基聯(lián)-基)甲基]氨基]-甲酸乙酯

雙硫(標準品)5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb鹽酸度洛西汀

*基氯化錫(標準品)Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb1-溴-2-氟-

氟樂靈標準溶液(10μg/ml,u=5%)Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb羧基-氯酸

殺蟲脲(標準品)MEK1/2 (D1A5) Rabbit mAb (PE Conjuga)N'-BOC-L-鳥氨酸;N'-叔丁氧羰基-L-鳥氨酸

異中殺蟲脲標準溶液(100μg/ml,u=2%)Bcl-2 Antibody (Human Specific)2,6-二氟乙酮

異中殺蟲脲標準溶液(10μg/ml,u=2%)Bcl-2 Antibody (Human Specific)2,6-二氟甲酸甲酯

四基錫(標準品)ATM (D2E2) Rabbit mAb5-甲基-2-噻吩甲

戊菌隆(分析標準品,99.5%)ATM (D2E2) Rabbit mAb1-甲基-1H-咪唑-磺酰氯

噻螨酮標準溶液(100μg/ml,u=3%)Phospho-Bcl-2 (Thr56) Antibody (Human Specific)5-甲基喹喔啉

噻螨酮標準溶液(10μg/ml,u=6%)Phospho-Bcl-2 (Thr56) Antibody (Human Specific)二叔丁基氯化膦

抑霉唑標準溶液(100μg/ml,u=2%)FE65 Antibody三叔丁基膦

環(huán)草隆(標準品)CASK Antibody碳酸鎂

2,4,5-涕酸(標準品)LITAF Antibody甲氧基-氯

西瑪津(標準品)FoxO1 (C29H4) Rabbit mAbBoc-L-羥脯氨酸

西瑪津標準溶液(10μg/ml,u=5%)FoxO1 (C29H4) Rabbit mAb[2-(2-氨基-4,7-二氫-氧代-3H-吡咯并[2,3]嘧啶-5-基)乙基]甲酸

氟蟲(標準品)ERp57 (G117) Antibody戊烷

五氯標準溶液(100μg/ml,u=2%，基體：)ERp57 (G117) Antibody氯-氟酸
波薩達斯球孢子菌探針法熒光PCR檢測試劑盒牛新包蟲抗體ELISA試劑盒Orexin receptor 1/2  食欲素受體抗體100 ul

牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA試劑盒P2P-R/RBBP6  增殖潛能相關(guān)蛋白抗體100 ul

牛心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)ELISA試劑盒P14ARF  抑癌基因p14抗體20 ul

牛心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒P16  抑癌基因p16抗體100 ul

牛腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)ELISA試劑盒P19ARF  p19ARF抑癌基因抗體100 ul

牛纖維蛋白原(Fb)ELISA試劑盒P21/CDKN1A  p21蛋白抗體100 ul

牛纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒P27 kip1  P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑100µl

牛纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒P2Y1R/P2ry1  P2Y1受體抗體100 ul

牛細胞色素b-245重鏈(CYBB)ELISA試劑盒P2Y4R/P2Ry4  P2Y4受體抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。