熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
鉍標準溶液（1000μg/ml,溶劑:1.5 mol/L HNO3）Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)異戊酸甲酯

鉍標準溶液（1000μg/ml,溶劑:1.0 mol/L HNO3）Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb (PE Conjuga)1-哌啶酸

鈹標準溶液（1000μg/ml,基體:1.5 mol/L HNO3）ALKBH7 AntibodyFmoc-L-吖丁啶羧酸

銅標準溶液（1000mg/l,溶劑：1%硫酸）CD40 Ligand (D5J9Y) Rabbit mAb2-氨基并噻唑-6-甲酸

銅標準溶液（500mg/l,溶劑:1%硫酸）BCL9 Antibody3'-溴酮

鉻標準溶液（三價鉻標準溶液1000μg/ml）Akt3 (E1Z3T) Rabbit mAb2,二氯-5-硝基三氟

鉻標準溶液（500mg/L,溶劑：水）TRIM27 (D5S4O) Rabbit mAb溴-2,5-二氟

鉻標準溶液（100µg/mL,基體：水）APC8 (D5O2D) Rabbit mAb喹啉-羧酸

鈣標準溶液（100µg/mL,基體: 5%HCl）NLRP3 (D4D8T) Rabbit mAb乙酰唑

鎘標準溶液（100µg/mL,基體: 1%HNO3）cGAS (D1D3G) Rabbit mAb5-甲基噻唑-2-甲酸

鎘標準溶液（0.100μg/g,基體:K+ 2.2mg/L,Na+ 23mg/L,Ca2+ 39mg/L,Mg2+ 11mg/L,0.5mol/L HNO3）cGAS (D1D3G) Rabbit mAb焦酸鈉十水合物

鈷標準溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸）Aiolos (D1C1E) Rabbit mAb酮基布洛芬

鈷標準溶液（100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3）IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb5--2-甲酸

鈰標準溶液（1000μg/ml,基體：10%HNO3）TREX1 (D8E2O) Rabbit mAb4,5-二氟鄰二甲酸

鏑標準溶液（1000μg/ml）Smac/Diablo (D5S3R) Rabbit mAb異氧基

溴代異辛烷（標準品）β-Tubulin (D2N5G) Rabbit mAb氨基異煙酸

銪標準溶液（1000μg/ml）Phospho-Akt (Ser473) (D9W9U) Mouse mAb (Biotinylad)叔丁氧羰基氨基哌啶

氟離子（F-）標準溶液（500mg/L,溶劑：水）YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)2-硝基-5-氟甲酸甲酯
耳念珠菌探針法熒光PCR檢測試劑盒波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒IL-29/IFNL1  白細胞介素29抗體100 ul

并殖吸蟲抗體(IgM)ELISA試劑盒IL-31  白細胞介素31抗體500 ul

并殖吸蟲抗體(IgG)ELISA試劑盒IL-31RA/CRL3  白介素31受體a抗體100 ul

型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)ELISA試劑盒IL-32/NK4  白介素32抗體100 ul

型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒IL-33/NFHEV  白介素33抗體100 ul

型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒IL-33  白介素33抗體500 ul

酰輔酶A羧化酶β多肽(PCCB)ELISA試劑盒IL-1 Alpha  白介素1α抗體100 ul

(ACR)ELISA試劑盒IL-1 Beta/IL-1B  白介素1β抗體100 ul

酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA試劑盒IL-2  白介素2抗體（大、）100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。