產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：22RV1 (前列腺癌細(xì)胞)供應(yīng)
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
生長培養(yǎng)基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
名稱  22RV1 (前列腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R

種屬 人類

年齡（性別） 男性,成人

組織來源 前列腺

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系；22RV1細(xì)胞系表達(dá)前列腺特異抗原。二羥基脂酮輕微刺激22RV1細(xì)胞生長，經(jīng)Western Blot檢測溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應(yīng)；EGF刺激22RV1細(xì)胞生長，但TGFβ-1不能抑制細(xì)胞生長；22RV1可在裸鼠中成瘤。

生物安全等級 2

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~40小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達(dá)情況 androgen receptor

注意事項(xiàng) 22RV1細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需要離心去除DMSO。凍存細(xì)胞復(fù)蘇初階段，貼壁量少，成簇松散貼壁，但是終細(xì)胞會變平并且擴(kuò)散成很好的單層，這個過程需要4-5天時(shí)間。細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞只能生長到90%的匯合度。細(xì)胞凍存后復(fù)蘇成活率不高，推薦凍存液配比為90%血清+10% DMSO，使用優(yōu)質(zhì)血清。

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2505 BCRC; 60545 DSMZ; ACC-438

冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
 1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；產(chǎn)品僅用于科研
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠睪酮(Testoterone)elisa檢測試劑盒

小鼠睪酮(T)elisa檢測試劑盒

小鼠睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒

小鼠高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)elisa檢測試劑盒

小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)elisa檢測試劑盒
大鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素1(PCSK1)elisa檢測試劑盒

大鼠前動力蛋白2(PK2)elisa檢測試劑盒

大鼠前動力蛋白2(PROK2)elisa檢測試劑盒

大鼠前動力蛋白受體1(PKR1)elisa檢測試劑盒

大鼠前列環(huán)素(PGI2)elisa檢測試劑盒
22RV1 (前列腺癌細(xì)胞)供應(yīng)兔子可溶性CD40配體試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規(guī)格型號：   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號：，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S 

兔子可溶性CD40配體(sCD40L)     7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  160129-45-3  中文名：  分子式：C10H10ClNO 

兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒   兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體試劑盒   規(guī)格型號：   兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒，規(guī)格型號：，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒、兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7α-Hydroxystigmasterol  64998-19-2  中文名：7α-羥基豆甾醇  分子式：C29H48O2 

兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒   兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒   規(guī)格型號：   兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體試劑盒，規(guī)格型號：，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒、兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7α-Hydroxysitosterol  34427-61-7  中文名：7α-羥基谷甾醇  分子式：C29H50O2 

兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒     7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  中文名：  分子式：C29H46O3  度：97.5%
培養(yǎng)操作:
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。